細胞培養實驗室設備配置及用途

时间:2021/8/9 13:54:08

目前絕大部分細胞培養設備實驗室使用超淨工作台實現無菌操作,具有操作簡單、安裝便宜、占用空間小且淨化结果很好。安徽人和淨化爲您介紹兩種要紧超淨工作台-側流式(铅直式)和外流式(水平層流式)。
1. 超净工作台 

        目前绝大部分細胞培養設備實驗室使用超淨工作台實現無菌操作,具有操作簡單、安裝便宜、占用空間小且淨化结果很好。安徽人和淨化爲您介紹兩種要紧超淨工作台-側流式(铅直式)和外流式(水平層流式)。工作原理一般是將室內空氣經粗過濾器初濾,由離心風機壓入靜壓箱,再經高效空氣過濾器精濾,由此送出的潔淨氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區,從而形成無塵無菌的高潔淨度工作環境。 

        (1) 侧流式工作台:空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧,也有从上向下或从下向上流向对侧,形成气流屏障保全工作区无菌,工作台结构为封闭式; 

        (2) 外流式工作台:净化后的空气面向操作者固定,因而外方气流不致混入操作,工作台结构为开放式,但进行有害物质实验操作对操作者不顺。超净工作台应需要时限请有关部门检查洁净度,适合要求的超净工作台其洁净度应达成100级,用尘埃粒子计数仪检测粒径≤5μm的尘埃粒子数量不应超过3.442个/L;空气流量应控制在0.75-1.0m3/s;细菌菌落数均匀<5892个,依据无菌状态需要时需要置换过滤器。 
細胞培養設備
2. 显微镜 

        倒置式显微镜是细胞培养实验室日常工作常规必备设备,要紧用于日常了解细胞的生长情况并观察有无 污染产生。如资金同意,意见选用配置有照相系统的高品相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、录像系统或缩时电影拍摄装置等,可随时拍摄并记载细胞生长情况。 

3. 培养箱 

        体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生活,一般最适生长温度为37℃,温差变化不应超过±0.5℃。温度升高2℃时,变不顺于细胞生活,温度达成40℃以上细胞将很快死亡。因此,可精 确控温的常温培养箱、CO2培养箱是佳选择。 

        (1) 常温培养箱:应选隔水式或晶体管式自控温培养箱,此类培养箱灵敏度高,温度控制较稳定。一般的常温培养箱价格较便宜,其弱点是只宜于作密闭式培养。 

        (2) CO2培养箱:目前多数的细胞培养室已广泛使用。CO2培养箱的优点是能够提供进行细胞培养时所需要的一定量的CO2(常用浓度为5%),易于稳定培养液pH,适用于开放或半开放培养。使用培养瓶时,为使培养瓶内与外界保全通气状态,可将瓶盖略微旋松,为幸免细胞被污染,使用这种培养方法时,培养箱内空气必须保全干净,需时限用紫外线照射或酒精消毒,同时培养箱内应放置盛有无菌蒸馏水的水槽,预防培养液蒸发,保全箱内相对湿度在100%。 

        (3) 细胞培养耗材:培养细胞的器皿可用培养皿、培养板或培养瓶。

4. 烘箱(干亢箱) 

        用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达成160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、结果较好,弱点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时结束,至100℃时,制止鼓风。需注重幸免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可妨碍细胞的生长。消毒后不能马上打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。 

5. 水纯化装置 

        细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养、细胞培养相关液体的配制用水以及清洗细胞培养器皿用水都必须事先通过严格的纯化处置。目前有多种纯化方法相结合,可使一般水纯化为纯水和超纯水的纯水装置使用非常灵活便宜,可挂壁式、台式、可配储水箱、也可直接用分液枪、还可依据各类实验用水要求选择配置杀菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉热源、内毒素的超滤型纯水装置。

6. 冰箱 

        细胞培养实验室必备设备,应专用,不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质,且应保全干净。一般包括一般冰箱、低温冰箱和超低温冰箱。 

一般冰箱:儲存培養液、生理鹽水、Hanks液試劑等培養用的物品,可短期保存組織樣本。 

        -20℃低温冰箱、超低温冰箱:用于储存需要冷冻以保全生物活性以及需长时期存放的制剂,如酶、血清等。 

7. 细胞冷冻储存器 

        储存器常用的液氮容器,依据使用需要分为不同类型和规格。选择液氮容器时需要考虑三个因素:容积大小、取放使用便宜、液氮挥发量。液氮容器的大小一般在25-500L,可以储存1ml的冻存管250-10048个左右。液氮温度低文帝可达-196℃,使用时应注重幸免冻伤。由于液氮易挥发,需注重观察剩余液氮量,即时补充,幸免液氮不足使细胞受损或死亡。目前有许多智能型细胞冷冻储存器可供选择,可配置有电子控制器的液氮储存器,实现冻存自动化;并可监测液氮水平和样品温度,确保样品温度始终处于设定温度点;可配置报警系统,设置液氮液面、温度、电池、电压、电源等失常情况下报警;同时具备热气体旁路系统,预防高于-130℃的暖空气进入液氮罐,从而更有效地保护样品,预防容器内升温。另外,可选择液氮供应罐通过连接管给储存罐补充液氮,保证样品安全。 

8. 离心机 

        细胞培养时,通常使用离心机制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤和收集细胞。一般常规配置4000rpm台式离心机;若要做细胞沉降,需要使用80-100G离心力,因为离心力过大会损害细胞。依据不同要求,有大容量、可调温度离心机、高速离心机和低温冷冻离心机等更多功能离心机可选择。

9. 天平 

        常用的有精密天平和分析天平。分析天平的精度一般为0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般依据取样量量和精度要求选择合适的天平:取样量大于100mg宜选用精度0.1mg的天平;取样量100-10mg,选用精度0.01mg的天平;取样量10mg宜选用精度0.001mg的天平。天平需要时限校准,可选择有自动校准功能的天平,便宜维护。天平使用需要注重干净,幸免腐蚀性粉末、液体直接接触称量台。
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